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外周血單個核細胞中肺炎衣原體的分離、培養(yǎng)及傳代

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外周血單個核細胞中肺炎衣原體的分離、培養(yǎng)及傳代

畢業(yè)論文

全部作者: 金前 孫書明 王衛(wèi)群 余竹元
第1作者單位: 復(fù)旦大學(xué)附屬金山醫(yī)院呼吸科
論文摘要: 目的 分離并培養(yǎng)肺炎衣原體(Chlamydia pneumoniae, Cpn),并進行傳代、擴增。方法 分離血液標(biāo)本中的外周血單個核細胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell, PBMC),用PEG使Cpn-Ag陽性的PBMC裂解釋放出Cpn,然后與Hep-2細胞1起離心,繼續(xù)培養(yǎng)Hep-2細胞。再將Hep-2細胞凍融破碎后,放入到新的Hep-2細胞中進行離心,以完成Cpn的1次傳代,然后以同樣的方法進行2次傳代。分別用微量免疫熒光法(Micro-immunofluorescence, MIF)及PCR法檢測Hep-2細胞中的Cpn-Ag和Cpn DNA。結(jié)果 MIF法檢測Cpn感染后的Hep-2細胞,其胞內(nèi)Cpn-Ag陽性;MIF法檢測1次傳代及2次傳代的Hep-2細胞,其胞內(nèi)Cpn-Ag亦均陽性;PCR法檢測Cpn DNA陽性。結(jié)論 該簡化方法可以實現(xiàn)PBMC中Cpn的分離,并實現(xiàn)進1步的培養(yǎng)及傳代。
關(guān)鍵詞: 肺炎衣原體;外周血單個核細胞;培養(yǎng);傳代 遠程下載 論文(免費PDF論文全文)
發(fā)表日期: 2007年04月27日
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外周血單個核細胞中肺炎衣原體的分離、培養(yǎng)及傳代

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