解析馬齒筧多糖對潰瘍性結腸炎小鼠腸道的影響論文
潰瘍性結腸炎( ulcerative colitis，UC) 又稱慢性非特異性潰瘍性結腸炎，是一種病因不明，反復發生腸道潰瘍，以腹瀉、黏液血便及腹痛為主要表現及侵犯直腸和結腸黏膜與黏膜下層為主的炎癥性病變。有學者研究發現，潰瘍性結腸炎常伴有腸道微生態的嚴重失調。馬齒筧多糖是中藥馬齒筧的提取物，近年來逐漸被重視和推廣。馬齒筧多糖是一種中藥益生元制劑，能調整菌群失調，尤其是對雙歧桿菌的生長有明顯的促進作用。本實驗擬研究馬齒筧多糖對UC 小鼠腸內容物揮發性脂肪酸及肝臟細菌易位的影響。
1 材料與方法
1. 1 實驗動物及主要試劑
昆明系清潔級小鼠，6～ 8 周，雌雄各半，體重18～ 22g，購于大連醫科大學實驗動物中心[許可證號: SCXK( 遼) 2008 - 0002]。EMB 瓊脂培養基由北京奧博星生物技術責任有限公司提供。藥物硫酸葡聚糖鈉( DSS，分子量5000) 購于廣州齊云生物科技有限公司; 中藥馬齒筧由佳木斯大學藥店提供。馬齒筧多糖制備，使用的主要儀器: 島津GC - 14C 氣相色譜儀，厭氧培養箱。
1. 2 實驗動物分組及藥物治療
1. 2. 1 動物分組及模型制備: 清潔級昆明種小鼠50 只，隨機分成2 組，正常對照組20 只，模型組30只。模型組飲用5% 葡聚糖硫酸鈉( DSS) 蒸餾水7d，正常對照組飲用蒸餾水。造模第7d 結腸炎小鼠模型明顯地出現體重減輕、從糊狀便到液態血便、懶動等癥狀，證明造模成功，處死正常對照組小鼠10只、模型組小鼠10 只，取標本進行各種指標檢測。把造模后的模型組小鼠分為2 組: 自然恢復組( 陰性對照組) 、馬齒筧多糖治療組，每組各10 只小鼠。
1. 2. 2 中藥治療: 模型制備后，自然恢復組小鼠、正常對照組灌胃等量的生理鹽水。馬齒筧多糖治療組灌胃0. 5g /mL 的馬齒筧溶液0. 3mL，每天2 次，連續7d。7d 后處死小鼠，取標本進行相應指標檢測。
1. 3 統計學方法
采用SPSS17. 0 軟件進行統計分析，用平均值±標準差表示，P < 0. 05 為差異有統計學意義。
2 結果
2. 1 各組小鼠腸內容物揮發性脂肪酸檢測
2. 1. 1 造模后，檢測了小鼠腸內容物揮發性脂肪酸，模型組小鼠與正常對照組比，腸內容物揮發性脂肪酸含量降低( P < 0. 05) 。
2. 1. 2 應用馬齒筧多糖治療后，小鼠腸內容物揮發性脂肪酸發生明顯改變，與自然恢復組比，差異具有統計學意義( P < 0. 05)。
2. 2 各組小鼠肝臟細菌易位檢測
2. 2. 1 飲用DSS 后，模型組小鼠與正常對照組比，肝臟腸桿菌數量增加，差異有統計學意義( P < 0. 05) 。
2. 2. 2 馬齒筧多糖治療組小鼠肝臟腸桿菌數量發生明顯改變，與自然恢復組比，差異具有統計學意義( P < 0. 05)。
3 討論
本實驗用5% 葡聚糖硫酸鈉造模后，模型組小鼠出現從糊狀便到液態血便、懶動、體重減輕等癥狀，這些改變證明UC 模型造模成功。小鼠腸內容物揮發性脂肪酸含量明顯下降，肝臟有腸桿菌易位，證實UC 同時存在腸道菌群失調。UC 小鼠存在腸道細菌易位，腸道黏膜的改變促進細菌易位。目前研究認為，UC 的發病主要與遺傳因素、環境因素和免疫因素有關，且三種因素相互影響，相互作用。而腸道內致病菌與正常菌群比例失調是觸發UC 發病的關鍵因素。腸道內致病菌、條件致病菌增多，增多的細菌分泌的腸毒素使腸上皮細胞通透性增高，并形成大量的氧自由基，其在腸黏膜的損害中起重要作用。病菌分泌免疫抑制性蛋白，導致局部腸黏膜免疫耐受失衡，腸上皮細胞更易受到致病菌的侵襲而損傷。并且，某些過度生長的細菌導致上皮細胞受損傷，誘發腸道炎癥的發生。
腸內容物揮發性脂肪酸主要來源于厭氧菌對碳水化合物和未消化蛋白質的發酵。厭氧菌是腸道揮發性脂肪酸的主要產生菌。模型組小鼠腸內容物揮發性脂肪酸降低，說明厭氧菌減少，小鼠出現菌群失調。UC小鼠應用中藥馬齒筧多糖治療后小鼠基本狀態恢復良好: 糞便性狀正常、體重增加; 腸內容物揮發性脂肪酸增加，肝臟腸桿菌數量下降; 腸道菌群失調得到改善。總之，馬齒筧多糖作為微生態調節劑可以增加小鼠腸內容物揮發性脂肪酸及降低肝臟腸桿菌數量、調整腸道菌群失調，通過促進雙歧桿菌的生長達到抗炎作用，對UC 有一定的治療效果。中藥是祖國醫學之瑰寶，用馬齒筧多糖協助治療UC，有利于疾病的治愈。
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